Introdução: Para promoção da qualidade da assistência e segurança do paciente o profissional da área da saúde possui a responsabilidade de se manter atualizado em sua área de atuação, além disso, cabe ressaltar que os estabelecimentos de saúde também necessitam promover ações educativas que visem o constante aperfeiçoamento de seus colaboradores. Objetivo: Relatar a experiência sobre a construção de um curso on-line acerca dos protocolos assistenciais de um Unidade de Terapia Intensiva Neonatal. Método: Trata-se de um relato de experiência, desenvolvido por enfermeiros de uma Unidade de Terapia Intensiva Neonatal, de um Hospital Universitário do Sul do Brasil vinculado a Empresa Brasileira de Serviços Hospitalares, no período de janeiro a junho de 2021. Por se tratar de um relato de experiência não foi necessária a submissão ao Comitê de Ética em Pesquisa. Resultados/Discussão: O curso desenvolvido foi disponibilizado on-line pela plataforma 3EC, com carga horária de 80 horas, tendo como público alvo a equipe multiprofissional da unidade. O ambiente de aprendizagem contou com aulas teóricas e vídeos práticos, além de textos complementares. Foram abordados oito módulos com 41 temáticas, dentre elas: manuseio mínimo, ações não-farmacológicas para o alívio da dor em neonatologia, método canguru, cuidados na termorregulação do recém-nascido, assistência ao corpo do recém-nascido após o óbito. No final de cada módulo havia um questionário para avaliação do conhecimento, após conclusão dos módulos e obtenção de 70% de aproveitamento nas perguntas ocorria a obtenção do certificado do curso. O curso buscou atualizar a equipe multiprofissional acerca dos protocolos assistenciais da Unidade de Terapia Intensiva Neonatal, uniformizar a organização e funcionamento adequado da unidade. Além disso, promover o conhecimento acerca dos protocolos assistenciais aos novos colaboradores inseridos na unidade. Considerações finais: Por meio da criação do curso foi possível proporcionar a melhoria continua dos processos de trabalho, padronizando a assistência realizada aos neonatos e familiares, além de promover a organização e funcionamento adequado da unidade e instituição.