INTRODUÇÃO: A higienização das mãos é considerada como uma técnica simples, eficaz e de grande importância para prevenção e controle das infecções; sendo indispensável sua realização de forma correta pelos profissionais de saúde. OBJETIVOS: Verificar o conhecimento de acadêmicos do curso de graduação em enfermagem quanto à indicação e a técnica da lavagem das mãos e o uso da preparação alcóolica. METODOLOGIA: Trata-se de uma pesquisa descritiva, quantitativa e exploratória. Utilizou-se como instrumento de coleta de dados o formulário validado da Organização Mundial de Saúde- OMS sobre “O conhecimento a respeito da higienização das mãos para profissionais de saúde”. A amostra selecionada por conveniência constituiu-se de acadêmicos de enfermagem de uma Instituição Particular de Ensino Superior de Sergipe. RESULTADOS: Verificou-se que 90,9% dos acadêmicos reconhecem que a principal rota de transmissão cruzada de microorganismos entre pacientes são as mãos de profissionais de saúde quando não higienizadas, e 80,7% distinguem que o ambiente hospitalar (objetos e superfícies) é a mais frequente fonte de microorganismos responsáveis pelas infecções. Um percentual 49,42% souberam diferenciar de forma correta a indicação entre lavagem das mãos e uso da preparação alcoólica e 20,5% reconhecem o tempo correto para eficácia do procedimento. CONCLUSÃO: Os acadêmicos reconhecem a importância da técnica, entretanto possuem dúvidas em relação à higienização das mãos, indicação, procedimento e tempo necessário para a realização da técnica de fricção alcoólica de forma eficaz. Diante do exposto, faz-se necessário maior ênfase na abordagem teórica e prática sobre a higienização das mãos evitando as lacunas do conhecimento sobre o tema exposto. DESCRITORES: Enfermagem. Desinfecção das mãos. Educação em saúde. REFERÊNCIAS: BRASIL. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Segurança do Paciente: Higienização das Mãos. Brasília, DF: ANVISA, 2010. Disponível em: <http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/manuais/paciente_hig_maos.pdf>. Acesso em 29 mar. 2012. BRASIL. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Teste de Conhecimento a Respeito da Higienização das Mãos para Profissionais de Saúde. Brasília, DF. Disponível em:<http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/controle/higienizacao_oms/Anexo%2035.pdf>. Acesso em: 01 jun. 2012.